杂质谱钻研要全面的思考杂质的起源、去向，必要结合具体的反映监控及后处置监控来发展，出格是肇始物料的杂质钻研，若是肇始物猜中的杂质钻研不够透辟，那么肇始物料的杂质就会有很大的可能性持续传递至后续的中央体
。

案例分享：对中央体的未知工艺杂质进行造备和结构确证

钻研布景

客户委托对中央体M01的未知工艺杂质进行造备和结构确证
。该杂质LCMS不电离，无法通过LCMS得到化合物的分子量，在对造备液进行后处置时，旋蒸和冻干都拿不到产品
。

? 中央体M01的ROS：

钻研思路

1、对比杂质及中央体的紫表光谱

2、造备情况

1）液相纯度大于98%；
2）waters SQD2碱性系统化合物不电离，酸性系统也不电离；
3）造备液高温、室温旋蒸后城市隐没不见；
4）造备液冻干后，检测不出峰
。

3、凭据以上，能够注定的以及猜测可能的情况

1）从紫表判断，未知杂质的母核注定有萘环结构，杂质和中央体M01的紫表吸收齐全一致，注明萘环没有衔接会导致紫表红移或者蓝移的基团
。
2）最有可能的是和萘环直接相连的亚甲基上面产生了变动
。
3）不电离，化合物没有ESI源能够电离的基团
。
4）旋蒸和冻干后液相检测都不出峰
。

4、SM01的ROS

5、造备液检测GCMS

检测发现杂质分子量是142.2，比萘多了一个甲基，凭据造备液GCMS的检测了局，结合肇始物料的ROS，肇始物料造备过程中可能会产生副产品甲基萘，随后对甲基萘进行调研
。

? 甲基萘的理化性质：
甲基萘是一种无色油状液体，有类似萘的气味，能与蒸气一起挥发，易燃，不溶于水，易溶于乙醚和乙醇
。相对密度（20℃）1.025,沸点245℃，闪点82.2℃
。

从甲基萘的理化性质，能够相识到甲基萘能够随蒸汽一起挥发：甲基萘的极性幼，水溶性差，造备液中有大量的水存在，在对造备液进行旋蒸和冻干处置时，甲基萘会随着蒸汽同时挥发；这一点很沉要，关系到造备液的正确后处置方式
。

6、扭转造备液后处置方式

◆ 造备液直接使用正己烷萃取，充分振摇后取等体积上清液和下清液用等体积乙醇稀释至一样体积；
◆ 检测甲基萘的含量，发现正己烷层溶液中甲基萘含量高于水层，或许是5:1的比例；
◆ 取正己烷层旋蒸后处置，取一滴旋蒸液加乙醇稀释后进样检测，能够检测到杂质峰，对中央体M01的未知杂质进行定位对比，旋蒸液检测的出峰功夫与M01中未知杂质出峰功夫一致；
◆ 进而对旋蒸液进行GCMS检测（图1），旋蒸液检测的分子量和造备液检测的分子量一致，确定后处置步骤，造备液第一次萃取处置完后再进行第二次萃取，削减样品损失，拿到产品后进行核磁检测确认（图2），确定杂质为1-甲基萘
。

图1：GCMS棒状图

图2：H-NMR

总 结

未知杂质钻研是一个综合性工作，必要的知识也是综合性的，必要钻研者可能凭据杂质和主成分的检测情况揣摩可能的结构变动，好比凭据杂质和主成分的紫表光谱差距来判断杂质的共轭变动、凭据杂质的红表检测情况揣度官能团变动、通过质谱确定未知杂质是否含有卤族元素（重要是Cl和Br）以及卤族元素的数量等，还必要钻研者有肯定的有机化学功底，凭据ROS揣摩反映可能存在的副产品，结合杂质的检测情况综合来判断杂质的结构
。

美研|CMC系列回首

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